Práctica 1. Determinación cualitativa de Factores Reumatoides. FR-Látex 24/09/2019

OBJETIVOS

  •  El objetivo de esta práctica es detectar factores reumatoides en suero fresco.

UTILIDAD CLÍNICA

  • Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de las inmunoglobulinas G. Su principal interés clínico radica en el diagnostico de la artritis reumatoide (RA).
  • Un estudio actual realizado por el "American College of Rheumatology" demostró que el 80,4% de pacientes con artritis reumatoide fueron positivos para el FR.

FUNDAMENTOS

  •  El FR-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de factores reumatoides (FR) en suero huemano. Las partículas cubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores reumatoides presentes en la muestra del paciente.

MATERIALES

Tarjeta látex
Bote para desechos
Micropipeta y puntas

REACTIVOS

Control positivo y negativo
Látex

PROCEDIMIENTO

  • PREPARAMOS CONTROL POSITIVO Y NEGATIVO.

  1. Atemperamos los controles a temperatura ambiente.
  2. Depositamos una gota (50 μL) de control positivo y control negativo en diferentes círculos de la tarjeta de látex.
  3. Mezclamos el reactivo de FR-Látex vigorosamente antes de usar. Depositamos una gota junto a cada una de las gotas anteriores.
  4. Mezclamos las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Es muy importante emplear palillos distintos para cada muestra.
  5. Agitamos con cuidado la tarjeta durante 2 minutos para que aparezcan los resultados.

  • MÉTODO SEMICUANTITATIVO. 

  1.  Depositamos 50 μL de muestra en el primer círculo.
  2. Depositamos 50 μL de solución salina fisiológica sobre cada uno de los seis círculos de la tarjeta.
  3. Realizamos diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L. El volumen de paso es de 50 μL.
  4. Pasamos 50 μL del primer círculo al número 2 y resuspendemos.
  5. Pasamos 50 μL del círculo 2 al número 3 y resuspendemos.
  6. Pasamos 50 μL del círculo 3 al número 4 y resuspendemos.
  7. Pasamos 50 μL del círculo 4 al número 5 y resuspendemos.
  8. Pasamos 50 μL del círculo 5 al número 6, resuspendemos y desechamos 50 μL.    
  9. Añadimos una gota de látex a cada uno de los círculos y mezclamos las gotas con un palillo.
  10. Agitamos con cuidado la tarjeta durante 2 minutos y esperamos a que aparezcan los resultados.

RESULTADOS

  •  Examinamos macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación. Observamos aglutinación hasta el círculo número 3, por lo que su título sería 4.
  • La concentración aproximada de FR en la muestra del paciente se obtiene: 8 x Títutlo de FR =  μL/mL, así que: 8 x 4 = 32 μL/mL.

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