Práctica 2. Waaler Rose. Hemaglutinación en tarjeta 01/10/2019

OBJETIVOS

  •  El objetivo de esta práctica es detectar Factores Reumatoides (FR) en suero utilizando la técnica: Waaler Rose.

UTILIDAD CLÍNICA

  • Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc de las inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de desordenes reumáticos, tales como el lupues eritematoso sistémico (SLE) y el síndrome de Sjögren, su principal interés clínico radica en el diagnóstico de la artritis reumatoide (RA).
  • Un estudio actual realizado por el "American College of Rheumatology" demostró que el 80,4% de pacientes con artritis reumatoide fueron positivos para el FR.

FUNDAMENTOS

  • El Waaler Rose es una técnica de hemaglutinación en tarjeta para la detección cualitativa y semicuantitativa de FR en suero humano. Los hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo anti-hematíe de oveja, son aglutinados por FR presentes en la muestra del paciente.

MATERIALES
Tarjeta látex

Bote para desechos
Micropipeta y puntas

REACTIVOS
Waaler Rose (suspensión de hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo anti-hematíe de oveja)
Solución Salina Fisiológica

MUESTRA
Suero humano

PROCEDIMIENTO

  • PREPARAMOS CONTROL POSITIVO.

  1. Atemperamos los controles a temperatura ambiente.
  2. Depositamos una gota (50 μL) de control positivo en uno de los círculos de la tarjeta de látex.
  3. Homogeneizamos suavemente el reactivo de Waaler Rose antes de usar. Depositamos una gota junto a la anterior.
  4. Mezclamos con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo
  5. Agitamos con cuidado la tarjeta durante 2 minutos para que aparezcan los resultados.

  • MÉTODO SEMICUANTITATIVO.

  1. Depositamos 50 μL de solución salina fisiológica sobre cada uno de los seis círculos de la tarjeta.
  2. Depositamos 50 μL de muestra en el primer círculo.
  3. Realizamos diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L. El volumen de paso es de 50 μL.
  4. Pasamos 50 μL del primer círculo al número 2 y resuspendemos.
  5. Pasamos 50 μL del círculo 2 al número 3 y resuspendemos.
  6. Pasamos 50 μL del círculo 3 al número 4 y resuspendemos.
  7. Pasamos 50 μL del círculo 4 al número 5 y resuspendemos.
  8. Pasamos 50 μL del círculo 5 al número 6, resuspendemos y desechamos 50 μL.
  9. Añadimos una gota de Waaler Rose a cada uno de los círculos y mezclamos las gotas con un palillo.
  10. Situamos la tarjeta sobre una superficie plana durante 2 minutos.
  11. Inclinamos la tarjeta unos 45º de la horizontal y dejarlo nuevamente en reposo durante 1 minuto.

RESULTADOS

  • Examinamos macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación comparándolo con el control positivo realizado anteriormente.
  • No observamos aglutinación en ninguna de las tarjetas, esto puede deberse a que el control positivo utilizado como suero humano estaba caducado.

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