Práctica 7. RPR-carbon. Aglutinación en porta 22/10/2019

OBJETIVOS

El objetivo de esta práctica es realizar una determinación cualitativa de reaginas plasmáticas, para conocer si existe una infección por Treponema pallidum.

Las reaginas son un grupo de anticuerpos dirigidos contra componentes del propio organismo, originadas en pacientes que sufren infección por Treponema pallidum, agente causal de la sífilis.
Este microorganismo produce lesiones en el hígado y corazón, liberando al torrente circulatorio pequeños fragmentos de estos órgnaos no reconocidos por el propio individuo. El sistema inmunológico del paciente reacciona dando lugar a la formación de reaginas, anticuerpos frente a estos fragmentos.

RPR-carbón es una técnica no treponémica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y semicuantitativa de reaginas plasmáticas en suero humano. Las partículas de carbón sensibilizadas con una mezcla de lípidos, son aglutinadas en presencia de reaginsa presentes en la muestra del paciente afectado por sífilis.

Atemperamos los reactivos y muestras a temperatura ambiente.
Depositamos una gota de cada uno de los controles positivo y negativo, sobre círculos distintos de un porta. Además, depositamos una gota de muestra (control positivo) en otro de los círculos.
Mezclamos el RPR-carbón vigorosamente, invertimos el vial dispensados y presionamos ligeramente para eliminar las burbujas de aire.
Utilizamos la aguja para dispensar una gota (20 μL) de este reactivo junto a cada una de las gotas anteriores.
Mezclamos las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo.
Situamos el porta sobre un agitador a 100 r.p.m. durante 8 minutos.

Examinamos macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación.
Los resultados son positivos, si comparamos el resultado de la muestra con los controles, veremos que los dos positivos presentan aglutinación.